pcr核酸檢測是什么意思方法及步驟?

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核酸檢測是目前全球用來對是否攜帶新冠病毒進行確定的一種有效方式。目前大家主要使用的是鼻拭子、咽拭子以及抗體血清lgm進行參考。但是根據(jù)最新的新加坡入境要求是進行pcr核酸檢測，那么pcr核酸檢測是什么意思呢？

pcr核酸檢測是什么意思

PCR的意思是聚合酶鏈式反應(yīng)，能夠用來擴增DNA，從而將微量的DNA擴增到能夠檢測的程度。有些病毒的核酸是DNA，需要采用這個方法進行檢測。所以PCR并不是進行的檢查，而是檢測DNA的一種方法。比如乙肝病毒DNA定量，用的就是這一種方法。檢查DNA的目的，一方面是可以診斷疾病，如果連病原體的DNA都能檢測到，就說明感染了這種病原體;另一方面是判斷病毒復(fù)制的多少，從而判斷病情嚴重程度或者治療效果。

pcr核酸檢測方法與步驟

進行核酸檢驗，需要經(jīng)過取樣、留樣、留存、核酸提取、上機檢測五個步驟。

核酸檢測的第一步就是采集人體分泌物，用鼻試子或咽試子擦拭鼻腔或咽后壁及雙側(cè)咽扁桃體處。

第二步醫(yī)務(wù)人員進行留樣，將試子頭浸入細胞保存液中，折斷尾部后立即旋緊管蓋。

第三部要將樣本放入密閉袋中，保存好并及時送檢。

第四步將樣本送進實驗室，提取核酸。

第五步，將提取物進行熒光PCR擴增反應(yīng)。

核酸是什么

核酸(nucleic acid)，是一類由核苷酸(nucleotide)構(gòu)成的生物大分子，分為核糖核酸(ribonucleic acid，RNA)和脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid，DNA)兩類，其中RNA多為單鏈結(jié)構(gòu)，DNA多為雙鏈結(jié)構(gòu)。除朊病毒(prion)外，核酸是構(gòu)成生命所必需的生物大分子，其主要作用是構(gòu)成生命體的遺傳信息載體，除此之外，還有部分核酸可作為及參與構(gòu)成具有生物活性的酶分子或其他分子機器。

核酸檢測是什么

核酸檢測顧名思義就是針對核酸開展檢測。

核酸檢測有何獨特的優(yōu)勢呢?為何能作為新冠病毒確診的“金標準”呢?

其實每一種檢測方法都有其擅長的應(yīng)用場景。以病毒檢測為例，通常的免疫學(xué)檢測方法(膠體金、ELISA、化學(xué)發(fā)光等)的檢測對象是病毒的抗原或抗體，相當于“側(cè)面描繪”。由于從感染到可檢測存在一個時間窗口期，因此免疫學(xué)檢測方法一般不合適作為早期診斷。

假陽性與假陰性

1、假陽性

假陽性通常比較少。一般實驗室人員操作不當會導(dǎo)致樣本間交叉污染或擴增產(chǎn)物的遺留污染，該種情況下可能會導(dǎo)致假陽性。

不過假陽性可以通過嚴格控制檢測流程、以及執(zhí)行若干個陰性樣本隨機參與檢測的策略而有效規(guī)避。

2、假陰性

在這里需要說明的是，PCR檢測的假陰性與臨床的假陰性實際上不是一個概念。

以網(wǎng)絡(luò)上激烈討論的新冠病毒的診斷為例，臨床假陰性是指臨床癥狀和影像學(xué)高度疑似被感染、但PCR檢測卻多次或始終為陰性的情況;而PCR檢測假陰性是指所采集樣本中存在足夠量的新型冠狀病毒但卻沒有檢出的情況。

避免核酸檢測的假陰性，主要需要解決：(1)被感染者的細胞中有足量的病毒、(2)采集樣本中可以采集到含有病毒的細胞、以及(3)檢測出樣本中的病毒這三個環(huán)節(jié)。

其中PCR試劑盒的技術(shù)參數(shù)優(yōu)劣主要影響第三個檢測環(huán)節(jié)。

僅針對第三個檢測環(huán)節(jié)，若樣本中病毒數(shù)量低于一個程度(低于最低檢測限)，PCR試劑盒就無法檢出。從這個角度看，PCR檢測的假陰性是無法完全避免的。這也是為何需要補充開發(fā)病毒的特異抗體檢測的原因所在。

沈陽PCR核酸檢測實驗室

實驗室建設(shè)堅持高標準、嚴要求，嚴格按照國家《醫(yī)學(xué)生物安全二級實驗室建筑技術(shù)標準》進行建設(shè)，建設(shè)面積100余平方米，分為試劑貯存和準備區(qū)、標本制備與提取區(qū)、擴增和產(chǎn)物分析區(qū)三個區(qū)域。實驗室內(nèi)配置全自動核酸提取儀、實時熒光定量PCR儀、擴增儀、高壓滅菌器、B2型生物安全柜、超凈工作臺、超低溫冰箱等儀器，消毒和防護設(shè)施齊全，符合相關(guān)生物實驗室安全標準。為防止實驗室外的區(qū)域被污染，實驗室的氣壓均為負壓，有效降低感染風險。此外，實驗室配備了污水處理系統(tǒng)，達到了廢液的合理排放和處理。

*目前我國多地區(qū)建設(shè)了PCR核酸檢測實驗室用以進行新冠病毒核酸檢測

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